猪体内脂肪沉积是一个非常复杂的过程，而脂肪细胞的分化是脂肪形成的第一步， 其分化的分子机制非常复杂，到目前为止尚未完全研究清楚。MicroRNAs(miRNAs)是近 几年来发现的内源性小分子RNA，长度在22-24nt左右，可以降解基因的转录本或影响蛋 白的翻译和表达，在转录后水平负调控基因的表达。近年来发现Wnt／B-catenin信号通 路在脂肪细胞的分化中扮演分子开关(switch)的作用，即脂肪细胞的分化必然伴随着 WNT信号通路的抑制；相反，WNT信号通路的激活也伴随着脂肪细胞的分化的抑制。鉴于 在脂肪分化的分子机制研究中同时涉及Wnt信号通路以及miRNA的研究非常少，本文利用 小鼠脂肪细胞结合脂肪分化和沉积相关的WNT信号通路，旨在阐明miRNA是如何调控WNT信 号通路从而影响脂肪细胞的分化机理。 本研究首先建立了关于脂肪细胞分化的两种模型，一种是正常分化的细胞模型，即 用MDI激素诱导3T3-LI小鼠前体脂肪细胞使其分化为成熟脂肪细胞，该细胞模型伴随着 WNT途径受到抑制；另一种是抑制分化模型，即先用LiCl处理3T3一Ll小鼠前体脂肪细胞， 进而用MDI激素诱导发现细胞分化受到抑制，即LiCl处理的前体脂肪细胞无法分化为成 熟脂肪细胞，该细胞模型伴随着wNT途径受到激活。 其次将两种细胞模型下的4种细胞(前体脂肪细胞，成熟脂肪细胞，LiCl处理的前 体脂肪细胞，LiCl处理后MDI诱导的未分化的细胞)和小鼠的miRNAs芯片杂交，筛选不 同分化状态下及信号通路的不同状态下表达有差异的miRNAs。通过生物信息学软件以及 在线软件工具对miRNA的靶基因进行预测，找到两组功能不同的miRNAs：第一组是通过 激活leNT信号通路，抑制脂肪细胞分化的miRNAs，有29个miRNA，包括miR-344，miR一27 and miR-181；第二组是通过抑制WNT信号通路，促进脂肪细胞分化的miRNAs，共18个 miRNA，包括miR一210，miR-148a，miR-194，miR-322等。 最后对部分miRNA的功能进行验证，结果发现miR一205，miR一210，miR一378可以通 过靶向WNT通路中的基因，抑制了WNT信号通路从而促进脂肪细胞的分化；与此相反， miR-23a，miR-709，miR-27a／b通过靶向wNT信号通路的抑制因子，从而激活WNT信号通路 抑制脂肪细胞的分化。 本研究首次结合miRNA和WNT信号通路对脂肪细胞分化的分子机制进行探讨，对脂 肪细胞分化的不同阶段以及WNT信号通路激活与抑制的不同状态中的miRNA进行表达谱 分析，同时对这些差异表达的miRNA进行靶基因预测以及靶基因互作的网络分析，并对 miRNA的具体功能进行实验验证，不仅为脂肪分化的表达调控提供新的思路，也为猪肉质 的改良的研究提供理论参考。
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