Waters高效液相色谱仪标准操作规程

仪器资料 · 发表于 2017-8-13 20:18:48

6. 规  程

6.1. Waters HPLC的组成：贮液器   输液泵  自动进样器   分离柱 (柱温箱 )   紫外检测器   控制及数据处理系统 (Millennium 32化学工作站 )。

6.2.    HPLC系统的打开及关闭顺序

6.2.1 打开顺序

• 对于分体式：请按泵、进样器、柱温箱、检测器的顺序打开开关，待各部分分别显示初始化完毕后，  最后打开 Millennium 32化学工作站  。

泵与色谱工作站的连接：对于  510  泵，因为此泵与色谱工作站是单向联系，如要使泵在 Remote 状态下由工作站控制，首先要在泵的键盘上按 Menu 键，待显示屏切换至 Mode 状态下，其状态是 Loca ，按 Edit/Enter 键，在 Local 的 L 前有闪动的光标显示，按  键，
Local 转换成 Rem，再按 Edit/Enter 键，此命令已输入进去, 最后按 Stop/Run 键，使泵处于Run  状态这时泵和工作站的连接即告成功。泵的任何动作都可由工作站来控制。还应注意这一步工作在每次开机  时都要进行。

对于 Alliance 2690 系统：先打开 Alliance 2690 主机、  检测器  电源开关，待初始化完毕后，再进入 Millennium 32 化学工作站。

对于流动相的要求：对于液体试剂应尽量采用色谱纯试剂；对于所用到的固体试剂应  采用分析纯试剂；对  于水，应采用经纯水机处理过的超纯水；流动相在使用前一定要经 0.45m  的滤膜（滤膜分为水相膜与有机相膜，  确保使用正确的滤膜，参见附表 ) 过滤、超声真空脱气方可使用，严禁含盐的流动相未经过滤直接使用。

应养成良好操作习惯：

规范操作，树立保护 HPLC 整套系统的概念，尤其对于输液泵、色谱柱、检测器，在使用后应及时冲洗，以免污染而使其寿命缩短或损坏，尤其如操作者使用了含盐的流动相，更应注意清洗的步骤：首先用脱过气的纯水在流速为1ml/min 左右  冲洗 30～60 分钟，再用含 50％以上甲醇或乙腈的水溶液以相同的流速冲洗 20～30 分钟左右。

如要卸下柱子，在经过上述冲洗过程之后，再经纯甲醇或乙腈  以1ml/min  的流速冲洗 20~ 30  分钟，柱子卸下后应马上拧紧柱堵。

流速的变化应采用阶梯式递增或递减的方式，启动泵时，  应在 2 分钟  之内由小流速慢慢增大到所需的流速，泵关闭时亦然( 流速递减)。切忌流速的骤变。