液相色谱实用技术，来自Waters公司的培训材料
液相色谱定量分析的基本原理
❀ 在定性的基础上定量,需有纯物质作为标准物
❀ 液相色谱定量是相对定量的方法:
即由已知量的纯被测物标样推算混合物中被测物的量
❀ 液相色谱法定量的依据是:
✎ 被测组分的量与响应值(峰高或峰面积)成正比
✎ 由已知量的标样可求得定量校正因子
✎ 定量校正因子:是定量计算公式中的比例常数,其物理
意义是单位响应值(峰面积)所代表的被测组分的量
✎ 测定未知组分的响应值,通过定量校正因子即可求得
其含量
色谱峰定性中常见问题分析
❀被鉴定峰丢失
✎保留时间改变
✎数据处理系统中输入值不正确
❀色谱图中出峰比预想的少
✎样品分解
✎色谱柱分辨率丧失
✎用错流动相
✎梯度洗脱时平衡不足(例如,过早将手动进样
器扳至(Load)位置
色谱峰定性中常见问题分析(续)
❀色谱图中出峰比预想的多(鬼峰):
✎样品分解或制样时导入了杂质
✎流动相被污染,或用错流动相
✎流动相中含有稳定剂或稳定剂发生变化
✎前次进样的后流出物(某些RT值特大的组分)
✎进样器被污染,洗针系统出问题或注射器脏
✎未充分平衡进样器Loop管
✎保护柱脏,色谱柱被污染,分辨率下降
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