API4000质谱培训资料之定量分析流程与经验

仪器资料 · 发表于 2017-9-8 20:35:25

第一步： Q1 SCAN——确定母离子的质荷比
● 根据待测化合物性质，选择分析的极性(＋/－)、离子化
方式(ESI/APCI)，根据分子量选择扫描范围和时间
● 确定母离子的质荷比，准确到小数点后一位。
第二步： Product Ion Scan —— 确定子离子的质荷比
● 得到高质量的MS2图，母离子的强度为图谱中基峰强度
的1/3到1/4为宜
● 平滑后选择子离子质荷比，确定到小数点后一位
第三步：优化化合物参数
● 根据前面选出的母、子离子，组建MRM离子对
● 选择多个离子对时，应合理分配每一对的分析时间
● 用“Ramp”，优化Compound项下各参数，以及Source
项下CAD参数。各离子对应分别设定。
● 初步建立MRM方法
第四步：方法转化：将连续进样方法→LC-MS方法
● 关掉所有质谱分析界面，将现有质谱体系灭活，激活液相色谱、
质谱设备。
● 单击Acquire中Build Acquire Method，打开上面保存过的MRM
方法，添加设备：色谱泵、自动进样器等。
● 设置色谱同步。
● 设置色谱参数，分析时间一般为0.6～1min，流动相组成和流量
与实际样品分析时相同；修改质谱分析时间，与色谱参数一致；
设置GS1、GS2、TEM初始值为40、40、400左右，保存方法，
例如：LC-MRM.dam。第五步：FIA-优化Source参数
● 将前面用过的样品溶液稀释100～1000倍。
● 在Tune项下，双击Quantitative Optimization，选择FIA分析，
根据向导进行自动优化。不接色谱柱进行FIA定量优化
● 注意：需要优化的各可选值之间用“;”分隔。
● 当对源参数含义及设置比较清楚后，可以省略此步。