实时荧光定量 PCR检测 H1N1亚型猪流感病毒

发表于 2018-10-16 13:25:56

实时荧光定量 PCR检测 H1N1亚型猪流感病毒
根据GenBank中HIN1亚型猪流感病毒NP基因的序列(DQ889686)，利用Premier express设计并合成1
对引物和相应的TaqMan探针，从猪流感病毒HN407株接种的鸡胚尿囊液中提取总RNA，经RT—PCR扩增NP
基因。将鉴定正确的NP基因片段克隆人pGEM—T Easy载体中，转化大肠杆菌JM109，经PCR及测序鉴定后得
到阳性重组质粒。以该阳性重组质粒为荧光定量PCR标准品模板建立标准曲线。对探针浓度、引物浓度、镁离子
浓度和退火温度进行优化，建立了最佳的荧光定量PCR反应体系和扩增程序。经临床应用表明荧光定量PCR 的
建立为早期诊断猪流感病毒、定量分析猪流感病毒感染程度奠定了基础。

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发表于 2019-4-13 16:26:39

珍惜生命，果断回帖；酌一杯清茶，品一起下吧资源

实时荧光定量 PCR检测 H1N1亚型猪流感病毒

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