分离肽和蛋白质色谱柱的维护

仪器资料 · 发表于 2017-6-5 23:06:02

分离肽和蛋白质色谱柱的维护

使用常规要求
pH: 为了保证色谱柱长寿命，硅胶基质色谱柱的使用 pH 范围是 2-7，超出此范围的色谱柱寿命与功能团结构有关，但是偏离 2-7 范围越远，色谱柱性能下降的越快。
温度：典型硅胶基质色谱柱的使用温度在 5°与 60°C 之间，高温使用会缩短柱寿命。
缓冲溶液：生物样品分离通常要求使用缓冲溶液控制流动相的 pH 值，仔细控制避免缓冲溶液与流动相有机溶剂混合时产生沉淀，色谱柱和 HPLC 系统不能储存在含盐或缓冲溶液的体系中。
压力：操作压力升高，色谱柱寿命缩短，通常要求色谱柱使用中压力低于 3000 psi。压力与流动相流速和柱长成正比，与粒径平方成反比。相同规格的 3μm 填料色谱柱压力约为 5μm 色谱柱的两倍。流动相不同压力也会有明显差异，如 60/40 的甲醇/水大约是 60/40 甲醇 /水的两倍。随色谱柱使用，压力会缓慢增加，色谱柱压力突然增加可能是色谱柱或连接管堵塞。

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