MM_FS_CNJ_0102出口肉肉制品磺胺甲氧哒嗪残留量薄层色谱法

仪器资料 · 发表于 2018-6-12 17:51:54

1.适用范围
本方法适用于出口牛肉中磺胺甲氧哒嗪残留量的检验。
2.原理概要
试样中残留的磺胺甲氧哒嗪和添加的内标物(磺胺吡啶)用乙酸乙酯提取，然后液-液分配进入甘氨酸缓冲液(pH12.25)。将水相pH值调至5.25后，用正己烷抽提以去除杂质。然后用二氯甲烷提取。在二氯甲烷中加入二乙胺，以防被测物在蒸发过程中被氧化。将二氯甲烷蒸发至近干，残渣用甲醇溶解并定容。溶液供薄层色谱法测定，标准曲线法定量。
3.主要试剂和仪器
3.1.主要试剂
乙酸乙酯；
二氯甲烷；
正己烷；
三氯甲烷；
特丁醇；
甲醇；
丙酮；
浓盐酸：密度(ρ)约1.19g/mL；
氢氧化钠溶液：10mol/L水溶液；
荧光胺溶液：30mg荧光胺溶于250mL丙酮中，可用于8～9块展开板；
二乙胺；
展开溶剂：三氯甲烷-特丁醇(80＋20)，当日新配；
甘氨酸缓冲液：0.2mol/L水溶液。使用前用10mol/L氢氧化钠溶液调pH值达到12.25(本步骤需在使用前、在20℃室温的蒸气浴上进行)；
磷酸盐缓冲溶液：2mol/L水溶液，用2mol/L的磷酸二氢钾与2mol/L的磷酸氢二钾混合。得到pH为5.25的缓冲溶液；
盐酸(1.7mol/L)-磷酸盐缓冲溶液(2mol/L，pH5.25)：(1＋1)；
磷酸盐缓冲溶液：0.20mol/L。称取45.646g磷酸氢二钾(K2HPO4•3H2O)，溶于1 000mL水中(溶液1)，另称取27.218g磷酸二氢钾，溶于1000mL水中(溶液2)，用溶液2调节溶1至pH为7.55±0.05(约80mL溶液1加20mL溶液2，混合成约100mL pH7.6的溶液)；
磺胺甲氧哒嗪标准品：纯度≥99%；
磺胺甲氧哒嗪标准储备液(1mg/mL)：准确称取100mg磺胺甲氧哒嗪(精确至0.1mg)于100mL容量瓶中，用丙酮溶解并定容后存放在聚乙烯瓶中，于－10℃保存可使用一个月；
内标储备液(1mg/mL)：准确称取100mg磺胺吡啶(精确至0.1mg)于100mL容量瓶中，用丙酮溶解并定容后存放在聚乙烯瓶中，于－10℃保存可使用一个月；
磺胺甲氧哒嗪标准工作液(10μg/mL)：移取标准储备液1mL于100mL容量瓶中，加pH7.6的缓冲溶液至刻度；
内标工作液(10μg/mL)：移取标准储备液1mL于100mL容量瓶中，加pH7.6的磷酸盐缓冲溶液至刻度；